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编号:13229564
不同时段尿标本检测巨细胞病毒在小儿人巨细胞病毒感染中的应用(2)
http://www.100md.com 2018年4月25日 《中国当代医药》 2018年第12期
     1资料与方法

    1.1一般资料

    选取2015年9月~2017年2月我院儿科收治的30例HCMV感染患儿,其中,男16例,女14例;年龄34 h~1岁,平均(6.5±2.7)个月。所有患儿分别于清晨采集晨尿作为晨尿组,于其他时段采集尿液作为随机时段组。所有患儿均符合《巨细胞病毒感染诊断方案》中诊断标准,经我院医学伦理委员会批准,患儿家属对本研究知情,且签署知情同意书。其中下呼吸道感染25例,高胆红素血症2例,肠炎3例,部分病例病程较长。

    1.2方法

    标本采集:晨尿组患儿于清晨6时采集患儿晨尿,随机时段尿组患儿当天任意时间内采集患儿尿标本。仪器试剂:采用ABI7300型荧光定量PCR仪(美国)检测HCMV,核酸扩增荧光定量检测试剂盒(中山大学达安基因股份有限公司)。检测方法:将采集到的尿液标本轻轻颠倒摇匀,用加样枪吸出100 μl,取离心管,装入DNA浓缩液100 μl,将吸出的尿液标本一并加入,振荡摇匀,在离心机上按12000 r速率离心10 min,将上清液去除,将DNA提取液20 μl加入到剩余的沉淀物中打匀,然后进行瞬时离心数秒,在100℃条件下保温10 min ......
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