pGL3—EPO—α—MHC启动子荧光素酶报告基因质粒的构建及缺氧调控功能考察(1)
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[摘要] 目的 考察EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下的调控表达作用。 方法 构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒，以含pGL3-EPO-α-MHC和pGL3-CMV启动子的质粒分别转染缺氧和常氧的心肌细胞(H9C2)，检测荧光素酶的表达。 结果 pGL3-CMV启动子质粒在缺氧条件下的报告基因表达与常氧条件相比显著下降(P < 0.05)，而pGL3-EPO-α-MHC启动子在缺氧条件下能够显著上调报告基因的表达4.3倍(P < 0.01)。 结论 EPO-α-MHC启动子具有缺氧调控功能。
[关键词] pGL3-EPO-α-MHC启动子；荧光素酶报告基因；质粒构建；缺氧调控
[中图分类号] R34 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721(2013)06(a)-0008-03
α-MHC promote是研究报道中常用的一种心肌特异性启动子，用于调控治疗基因在心肌组织的特异性表达[1]。为了增加治疗基因在心肌缺血缺氧区域的表达，本研究选用促红细胞生成素(erythropoietin，EPO)作为心肌特异性启动子的缺氧反应调控元件。构建pGL3-EPO-α-MHC启动子编码荧光素酶报告基因的质粒(pGL3-EPO-α-MHC-LUC)，考察该质粒在缺氧条件下的表达，评价EPO-α-MHC启动子的缺氧调控功能。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
荧光化学发光酶标仪(美国Thermo公司)； 紫外分光光度计(美国 Thermo公司) ......
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