脐血间充质干细胞的分离培养鉴定及诱导分化研究
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2013年4月1日
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潘丽杰 陈妍 袁杰 哈尔滨医科大学附属口腔医学院口腔预防保健科;
【摘要】目的:分离培养人脐血间充质干细胞(human umbilical cord blood-derived mesenchymal stem cells,hUCB-MSC),体外观察其生长特性,并在特定条件下诱导分化,探讨其成脂成骨分化能力。方法:采用沉降法和密度梯度离心结合贴壁培养法自脐血中分离间充质干细胞,倒置显微镜下观察其形态及生长情况;流式细胞仪分析细胞周期并检测细胞表面标志物;用茜素红染色和油红O染色分别鉴定其成骨成脂分化能力。结果:纯化的hUCB-MSC贴壁生长,呈均一梭形,具有较强的增值能力,流式细胞仪分析P3代hUCB-MSC稳定表达间充质干细胞表面抗原标志CD73,CD105和CD90等,不表达造血标志CD34和CD45;成骨诱导后3周后细胞茜素红染色阳性;成脂诱导3周后细胞油红O染色阳性。结论:本实验分离的hUCB-MSC具有较强的增殖能力,表达间充质干细胞的表面标记,具有成骨成脂分化潜能。
【关键词】 脐血 间充质干细胞 分化 鉴定
【基金】黑龙江省自然科学基金资助项目(编号D200972)
【分类号】R329
间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs),作为一种成体干细胞用于再生医学修复各种间叶组织如骨、软骨、肌肉等,具有广阔的发展空间[1-2],目前应用较为广泛为骨髓间充质干细胞,但由于骨髓取材属有创操作且干细胞随供体年龄增大有老化倾向等问题,在一定程度上限制其临床应
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